抑菌剂在开放组培中的使用及效果研究一,浦东花卉批发市场搬那里去了
材料与方法1供试品1供试品50%多菌灵可湿性70%代森锰锌可湿性yl-6%冠俊清50%洗必泰75%百菌清可湿性2株微球菌、葡萄球菌和青霉Dui在纯3培养基yeb培养基中分离;PDA 2试验方法1污染菌鉴定革兰氏染色方法2抑菌强度测定用无菌水稀释至1000mg/L。将2ml对数相菌悬液(真菌用2ml孢子菌悬液(106/ml))与20ml yeb(真菌PDA)培养基混合,倒入平板中。凝固后,将每个平板置于两个直径为8mm的牛津杯中,一个杯中加入0.2ml药物,另一个杯中加入无菌水作为对照。28年培养℃ 培养箱。葡萄球菌培养24小时,微球菌和真菌培养48小时,测定抑菌3菌的最低抑菌浓度(MIC),用无菌水稀释至2000mg/L储备液中,再用1:2、1:4稀释至625mg/L,l:8.其余用无菌水制成106孢子/ml悬浮液,进行菌丝生长抑制实验。将2ml孢子悬液与20ml PDA培养基混合,在28℃培养48h后倒入平板中℃ 培养箱,准备使用。用无菌水将试剂稀释至2000 mg/L储备液中,然后制备1000、500和25 mg/L药物培养基。对照组用冲头(直径7mm)从备用板上取菌饼,将菌丝面朝下接种于加药培养基中央,每板加一个菌饼,重复3次,置28℃培养箱中培养℃ 培养箱在光照下,每两天,生长抑制率(%)={(对照菌落直径-菌饼直径)-处理菌落直径-菌饼直径)/(对照菌落直径-菌饼直径)}*100菌落发芽抑制试验。孢子接种于液体PDA中,28℃摇床培养℃ 130rad/min,24h,双层纱布过滤后,用无菌水配制104细胞/ml,用无菌水稀释成2000mg/L储备液。制备102mg/L含药培养基。2ml孢子悬液与不同浓度的含药培养基混合,28℃培养℃ 3次孢子萌发抑制率(%)={(对照发芽率处理发芽率)/对照发芽率}x100植物生长抑制试验及开放组织培养的初步研究。用无菌水配制2000mg/L储备液,以4000rad/min离心10min,用孔径为20nm的滤膜过滤上清液,过滤后的储备液与培养基混合,制成1025mg/L的含药培养基。将健壮的马铃薯植株切成小块,接种在含药培养基上。对照培养基为不含药物的培养基。每个梯度有6瓶,每瓶10株,浦东花卉批发市场搬那里去了。其中正常放置3瓶。3天后观察马铃薯生长情况,另3瓶打开,20天后观察马铃薯污染情况
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